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對照品

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標準品的制備方法有哪些?

2021-09-23 17:07:47

  標準品的制備:標準品的制備是一個非常復雜的問題,也是標記免疫分析中比較難制備的成分。以下博林達討論了實驗室標準品(或商業(yè)試劑中的標準品)的制備。

 

  基質制備:如上所述,標準品的介質(基質)組成應與供試品相同。對于大多數(shù)用于測定血清中某種物質的標準品,采用不含待測物質的零血清來制備反應介質環(huán)境。但有時零值血清的制備是很困難的,所以有些標準品用適當?shù)木彌_液配制,并在緩沖液中加入一定量的載體蛋白(通常為1%~2%牛血清白蛋白)使其成為類似于樣品的介質環(huán)境。

 

  零值血清的制備方法有:

  吸附法:血清中的小分子物質,如三碘甲腺原氨酸(T3)、甲狀腺素(T4)等,可用活性炭吸附去除。這種方法簡單,但被測物質去除困難,不能用這種方法制備大分子活性物質。

 

  反復凍融法:大分子活性物質可用低值血清,反復凍融使受試物失活。這樣可以滅活大部分蛋白質激素,但也很難獲得真正的零值血清。

 

  親和層析法:用特異性抗體制備親和層析柱吸附待測抗原。該方法可用于獲得高質量的零值血清,但該方法較為復雜且成本較高。

 

  標準物純品的選擇:應選擇化學純度高、免疫純度高的純品作為標準品。其中,免疫純度尤為重要,標準品中不應含有與被測物質發(fā)生交叉反應的物質。

 

  標準品的制備:先用零值血清制備高濃度標準品,然后按照實驗系統(tǒng)的要求,將高值血清用零值血清稀釋至所需濃度,使其達到預定的濃度,要求并由不同濃度的系列標準品組成。


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